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一、重組蛋白重組蛋白（recombinantprotein）是指應(yīng)用重組DNA或重組RNA技術(shù)而獲得的蛋白質(zhì)。重組蛋白工程先應(yīng)用基因克隆或化學(xué)合成技術(shù)獲得目的基因（geneofinterest，GOI），連接到適合的表達(dá)載體，導(dǎo)入到特定的宿主細(xì)胞，利用宿主細(xì)胞的遺傳系統(tǒng)，表達(dá)出有功能的蛋白質(zhì)分子。重組蛋白的正確溶解步驟包括離心、溶解和（可能的話）進(jìn)一步處理。二、重組蛋白溶解步驟一開蓋前離心試劑管。凍干粉在運(yùn)輸過程中可能會(huì)因顛簸而漂散并粘貼于管壁或管蓋上，所以在打開塑料瓶蓋前，...

一、前言蛋白質(zhì)印跡法（WesternBlot）通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細(xì)胞或生物組織樣品進(jìn)行著色，通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細(xì)胞或組織中表達(dá)情況的分子生物學(xué)技術(shù)。WesternBlotting實(shí)驗(yàn)單層貼壁細(xì)胞總蛋白的提取步驟：二、操作步驟1.倒掉培養(yǎng)液，并將瓶倒扣在吸水紙上使吸水紙吸干培養(yǎng)液（或?qū)⑵恐绷⒎胖靡粫?huì)兒使殘余培養(yǎng)液流到瓶底然后再用移液器將其吸走）。2.每瓶細(xì)胞加3ml4℃預(yù)冷的PBS（0.01MpH=7.2～7.3）。平放輕輕搖動(dòng)1...

一、細(xì)胞凍存細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，這樣在需要的時(shí)候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。二、WakoBAMBANKER®無血清細(xì)胞凍存液簡介WakoBAMBANKER®無血清細(xì)胞凍存液是一款無血清、無動(dòng)物源且成分明確的即用型細(xì)胞凍存液，適用幾乎所有類型細(xì)胞株。相比...

一、細(xì)胞核結(jié)構(gòu)：細(xì)胞核的結(jié)構(gòu)有核膜、核仁、染色質(zhì)、核基質(zhì)。主要功能是遺傳物質(zhì)DNA儲(chǔ)存和復(fù)制的主要場所，是細(xì)胞遺傳和代謝的控制中心。①核膜：核膜是細(xì)胞核的外部邊界，由內(nèi)外兩層單位膜組成，將細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)分隔開來。②核孔復(fù)合體：核孔復(fù)合體是核膜上的特殊結(jié)構(gòu)，由多種蛋白質(zhì)組成，形成環(huán)狀開口，允許大分子物質(zhì)如mRNA、tRNA以及某些蛋白質(zhì)在核質(zhì)之間穿梭。③染色質(zhì)：染色質(zhì)是細(xì)胞核內(nèi)的重要組成部分，由DNA和蛋白質(zhì)組成，是遺傳信息的載體。④核仁：核仁是細(xì)胞核內(nèi)的一個(gè)致密結(jié)構(gòu)區(qū)域，與核...

一、實(shí)驗(yàn)原理?鎳柱純化實(shí)驗(yàn)的原理基于固定化金屬離子親和色譜(IMAC)?，這是一種利用金屬離子與配體之間的特異性相互作用來分離蛋白質(zhì)的方法。鎳柱純化利用Ni2+與帶有咪唑基團(tuán)的組氨酸(His)標(biāo)簽的蛋白質(zhì)之間的相互作用，從而實(shí)現(xiàn)目的蛋白的純化。具體來說，鎳柱中含有Ni2+離子，這些離子能夠與組氨酸上的咪唑基團(tuán)形成配位鍵，從而選擇性結(jié)合帶有His標(biāo)簽的目的蛋白。由于不帶His標(biāo)簽的蛋白無法與Ni2+形成配位鍵，因此能夠有效地區(qū)分目的蛋白與非目的蛋白。在純化過程中，首先通過Bin...